Ebola & Marburg Diagnostik: WHO-Leitlinie 2024

Auf einen Blick

• Die Nukleinsäureamplifikationstechnik (NAAT) ist die empfohlene Methode zur Bestätigung von Orthoebolavirus- und Orthomarburgvirus-Infektionen.
• Bei lebenden Patienten wird EDTA-Vollblut oder -Plasma empfohlen, bei Verstorbenen ein oraler Abstrich.
• Fällt ein Test negativ aus, der <72 Stunden nach Symptombeginn entnommen wurde, muss zwingend ein zweiter Test nach >72 Stunden erfolgen.
• Asymptomatische Kontaktpersonen sollen nicht getestet, sondern 21 Tage überwacht werden.
• Für die Entlassung aus dem Behandlungszentrum sind zwei negative Tests im Abstand von mindestens 48 Stunden erforderlich.

Hintergrund

Die Viren der Gattungen Orthoebolavirus und Orthomarburgvirus gehören zur Familie der Filoviridae. Sie werden von Wildtieren auf den Menschen übertragen und verbreiten sich durch Mensch-zu-Mensch-Übertragung. Die Inkubationszeit beträgt meistens 3 bis 10 Tage, kann aber zwischen 2 und 21 Tagen variieren.

Gattung	Spezies	Virus	Erkrankung
Orthoebolavirus	O. bundibugyoense	Bundibugyo-Virus (BDBV)	Bundibugyo-Virus-Krankheit
Orthoebolavirus	O. sudanense	Sudan-Virus (SUDV)	Sudan-Virus-Krankheit
Orthoebolavirus	O. taiense	Taï-Forest-Virus (TAFV)	Taï-Forest-Virus-Krankheit
Orthoebolavirus	O. zairense	Ebola-Virus (EBOV)	Ebola-Virus-Krankheit (EVD)
Orthomarburgvirus	O. marburgense	Marburg-Virus (MARV) & Ravn-Virus (RAVV)	Marburg-Virus-Krankheit (MVD)

(Hinweis: Bombali- und Reston-Viren sind bisher nicht als humanpathogen bekannt.)

Indikationen zur Testung

• Verdachtsfälle: Alle Personen (lebend oder verstorben), die die Falldefinition erfüllen, müssen getestet werden.
• Entlassung: Bestätigte Patienten dürfen erst entlassen werden, wenn zwei negative Tests aus Blutproben vorliegen, die im Abstand von mindestens 48 Stunden entnommen wurden.
• Keine Testung bei Asymptomatischen: Asymptomatische Kontaktpersonen sollen nicht getestet werden, da die Wahrscheinlichkeit eines RNA-Nachweises vor Symptombeginn sehr gering ist. Sie müssen stattdessen 21 Tage überwacht werden.

Probenmaterial und Lagerung

Die Wahl des Probenmaterials hängt vom Status des Patienten ab:

• Lebende Patienten: EDTA-Vollblut oder -Plasma. (Orale Abstriche werden aufgrund geringerer Viruslast nicht empfohlen).
• Verstorbene: Oraler oder bukkaler Abstrich (bevorzugt Nylon-Flockabstriche) in viralem Transportmedium (VTM).

Probenart	Lagerungsdauer	Temperatur
EDTA-Blut/Plasma/Serum	≤ 24 Stunden	Raumtemperatur (bis 25°C)
EDTA-Blut/Plasma/Serum	1 – 7 Tage	2 – 8°C
EDTA-Blut/Plasma/Serum	> 7 Tage	-20°C oder kälter (Vollblut nicht einfrieren!)
Orale Abstriche in VTM	≤ 24 Stunden	Raumtemperatur
Orale Abstriche in VTM	1 – 7 Tage	2 – 8°C
Orale Abstriche in VTM	> 7 Tage	-20°C (oder -70°C falls verfügbar)

Diagnostik-Methoden

Die Nukleinsäureamplifikationstechnik (NAAT), meist RT-PCR, ist die Methode der Wahl. Sie liefert schnelle Ergebnisse (<6 Stunden) und wird an inaktiviertem Virusmaterial durchgeführt.

Assay-Ziel	Zweck
Pan-Filovirus NAAT	Bestätigung einer humanpathogenen Filovirus-Infektion
Orthoebolavirus genus-spezifisch	Bestätigung einer Infektion durch eine Orthoebolavirus-Spezies
Orthomarburgvirus genus-spezifisch	Bestätigung einer Infektion durch Marburg- oder Ravn-Virus
Spezies-spezifische NAAT	Genaue Identifikation (z.B. Zaire, Sudan, Bundibugyo)

Weitere Methoden:

• Antigen-Schnelltests (Ag-RDTs): Zeigen eine geringere Sensitivität als NAAT. Sie werden nicht zur routinemäßigen Bestätigung neuer Ausbrüche empfohlen.
• Serologie (IgM/IgG): Sollte nicht allein zur Diagnose herangezogen werden, ist aber nützlich für epidemiologische Untersuchungen oder bei unklaren NAAT-Ergebnissen.

Interpretation der Ergebnisse

Phase	Testergebnis	Falldefinition
Symptomatisch	NAAT (+)	Akuter bestätigter Fall
Symptomatisch	NAAT (-) nach >72h seit Symptombeginn	Kein Fall (Non-case)
Post-symptomatisch	NAAT (-) und IgM (+) sowie IgG (+)	Bestätigter rekonvaleszenter Fall

Wichtig: Wenn ein Patient <72 Stunden nach Symptombeginn negativ getestet wird, muss ein zweiter Test mit einer Blutprobe durchgeführt werden, die >72 Stunden nach Symptombeginn entnommen wurde.

Biosicherheit und Laborhandling

Alle Proben gelten als potenziell hochinfektiös.

• Inaktivierung: Vor der Manipulation außerhalb von Hochsicherheitsbereichen (Class III Biosafety Cabinet/Glovebox) müssen validierte Inaktivierungsmethoden (z.B. Guanidinthiocyanat + Ethanol, Hitze 60°C für 15 Min) angewendet werden.
• Abfallentsorgung: Alle Abfälle müssen vor der Entsorgung an der Quelle dekontaminiert werden (z.B. chemische Desinfektion + Autoklavieren).

Praxis-Tipp

Testen Sie asymptomatische Kontaktpersonen nicht routinemäßig. Bei einem negativen NAAT-Ergebnis innerhalb der ersten 72 Stunden nach Symptombeginn muss zwingend eine zweite Blutprobe nach Ablauf der 72 Stunden entnommen und getestet werden.

Häufig gestellte Fragen

Welches Probenmaterial wird für die Ebola-Diagnostik benötigt?

Bei lebenden Patienten wird EDTA-Vollblut oder -Plasma benötigt. Bei Verstorbenen sollte ein oraler oder bukkaler Abstrich in viralem Transportmedium (VTM) entnommen werden.

Wann darf ein Ebola-Patient entlassen werden?

Ein Patient darf entlassen werden, wenn er klinisch gesund ist und zwei negative NAAT-Tests aus Blutproben vorliegen, die im Abstand von mindestens 48 Stunden entnommen wurden.

Sind Antigen-Schnelltests (Ag-RDTs) zur Bestätigung geeignet?

Nein. Aufgrund ihrer geringeren Sensitivität im Vergleich zur PCR (NAAT) werden Antigen-Schnelltests nicht zur routinemäßigen Bestätigung neuer Ausbrüche empfohlen.

Wie lange ist die Inkubationszeit bei Ebola und Marburg?

Die Inkubationszeit beträgt in den meisten Fällen 3 bis 10 Tage, kann aber insgesamt zwischen 2 und 21 Tagen variieren.

Was ist zu tun, wenn der erste PCR-Test negativ ist?

Wurde die Probe weniger als 72 Stunden nach Symptombeginn entnommen, muss zwingend eine zweite Probe nach Ablauf der 72-Stunden-Marke entnommen und erneut getestet werden.