Säurefeste Stäbchen (AFB) Diagnostik: StatPearls Leitlinie

Hintergrund

Säurefeste Stäbchen (AFB) zeichnen sich durch ihre Widerstandsfähigkeit gegenüber der Entfärbung durch Säuren während des Färbeprozesses aus. Laut der StatPearls-Zusammenfassung ist diese Eigenschaft besonders für die Diagnose von Mycobacterium tuberculosis von zentraler klinischer Bedeutung.

Neben Mykobakterien weisen auch andere Erreger wie Nocardien sowie bestimmte Parasiten (z. B. Kryptosporidien) eine Säurefestigkeit auf. Die mikroskopische Untersuchung auf AFB bleibt insbesondere in ressourcenärmeren Regionen ein essenzieller Bestandteil der Tuberkulose-Diagnostik.

Obwohl zunehmend molekularbiologische Verfahren wie Nukleinsäure-Amplifikationstests (NAAT) zum Einsatz kommen, behält die AFB-Mikroskopie ihren Stellenwert. Sie wird weiterhin zur Beurteilung der Infektiosität und zur Überwachung des Therapieansprechens eingesetzt.

Empfehlungen

Sputumgewinnung

Die Leitlinie betont, dass Sputum das primäre Probenmaterial für die Diagnostik darstellt. Es wird eine Mindestmenge von 5 Millilitern gefordert, um eine ausreichende Sensitivität zu gewährleisten.

Für die Gewinnung werden folgende Methoden beschrieben:

• Überwachtes Abhusten als Standardmethode

• Sputuminduktion mittels Inhalation von 3-5 %iger warmer hypertoner Kochsalzlösung

• Bronchoskopie als ergänzende Untersuchung, falls andere Methoden versagen

• Magensaftaspiration am frühen Morgen, was besonders bei Kindern empfohlen wird

Laut den Centers for Disease Control and Prevention (CDC) werden drei aufeinanderfolgende Sputumproben im Abstand von 8 bis 24 Stunden benötigt. Dabei sollte mindestens eine Probe ein Morgensputum sein.

Mikroskopische Verfahren

Für den Nachweis säurefester Stäbchen werden primär zwei Färbemethoden empfohlen. Beide Verfahren gelten als hochgradig reproduzierbar.

• Die Ziehl-Neelsen-Färbung (Heißfärbung) mit Carbolfuchsin und Methylenblau als Gegenfärbung

• Die Fluorochrom-Färbung (z. B. Auramin-O), welche eine schnellere Auswertung ermöglicht

Die Leitlinie hebt hervor, dass die Fluoreszenzmikroskopie bei Proben mit geringer Bakterienlast eine höhere Sensitivität aufweist. Zudem erfordert sie weniger Zeit für die Befundung negativer Proben.

Befundinterpretation und Reporting

Die Dokumentation der Ergebnisse muss standardisiert erfolgen. Die Leitlinie zitiert hierfür die WHO-IUTLD-Kriterien zur Graduierung der Bakterienlast bei der Ziehl-Neelsen-Färbung.

Befund	Kriterium (Lichtmikroskopie)	Interpretation
0	Keine AFB in 300 Gesichtsfeldern	Negativ
Genaue Zahl (z. B. +4)	1-9 AFB in 1 Länge	Spärlich positiv
1+	10-99 AFB in 1 Länge	Positiv
2+	1-10 AFB pro Feld in mind. 50 Feldern	Positiv
3+	>10 AFB pro Feld in mind. 20 Feldern	Positiv (hochinfektiös)

Ein positiver mikroskopischer Befund bestätigt das Vorhandensein säurefester Strukturen, beweist jedoch nicht zwingend eine Infektion mit M. tuberculosis.

Für die Differenzierung von multiresistenten Stämmen (MDR-TB) ist die Mikroskopie nicht geeignet. Hierfür wird die Durchführung von Kulturen und Medikamenten-Empfindlichkeitstests (DST) gefordert.

Praxis-Tipp

Ein häufiger Fehler in der Präanalytik ist die Einsendung von Speichel anstelle von tiefem Sputum, was zu falsch-negativen Ergebnissen führt. Die Leitlinie warnt zudem davor, dass direkte Sonneneinstrahlung oder übermäßige Hitze die säurefesten Stäbchen in der Probe zerstören können. Es wird betont, dass falsch-positive Befunde durch die Wiederverwendung alter Objektträger oder Kreuzkontaminationen entstehen können.

Häufig gestellte Fragen

Wie viel Sputum wird für eine AFB-Diagnostik benötigt?

Laut Leitlinie ist eine Mindestmenge von 5 Millilitern Sputum erforderlich. Geringere Volumina reduzieren die Sensitivität des Tests signifikant.

Wie viele Sputumproben müssen für die Tuberkulose-Diagnostik abgenommen werden?

Die CDC empfehlen die Abnahme von drei aufeinanderfolgenden Proben im Abstand von 8 bis 24 Stunden, darunter ein Morgensputum. Die WHO empfiehlt in ressourcenlimitierten Settings zwei Proben für eine taggleiche Diagnose.

Welche Färbemethode ist bei säurefesten Stäbchen überlegen?

Sowohl die Ziehl-Neelsen- als auch die Fluorochrom-Färbung sind laut StatPearls hochgradig reproduzierbar. Die Fluoreszenzmikroskopie bietet jedoch Vorteile bei der Erkennung geringer Bakterienmengen und ist zeitsparender.

Kann die AFB-Mikroskopie eine multiresistente Tuberkulose (MDR-TB) erkennen?

Nein, die mikroskopische Untersuchung kann nicht zwischen sensiblen und resistenten Stämmen unterscheiden. Hierfür werden laut Leitlinie spezifische Kulturen und Resistenztestungen benötigt.

Wie wird eine Sputuminduktion korrekt durchgeführt?

Wenn ein Patient nicht produktiv abhusten kann, wird die Inhalation von vernebelter, warmer, hypertoner Kochsalzlösung (3 bis 5 %) empfohlen. Die Probe muss zwingend als "induziertes Sputum" markiert werden, da sie wässriger ist und sonst fälschlicherweise als Speichel verworfen werden könnte.